Terapia con stem cells: Neumonia (estudio)

Referencia bibliográfica: 

1. Naveen Gupta y Victor Nizet. La Estabilización Del Alfa De Factor-1 Inducible De Hipoxia Aumenta La Capacidad Terapéutica De Las Células Madre Mesenquimales Derivadas De La Médula Ósea En La Neumonía Experimental [internet] Reino Unido. 2018 [citado 24 Jun 2018] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5945808/pdf/fmed-05-00131.pdf

ADN RECOMBINANTE

Refrencias bibliograficas:

1. Gasmi. l, Boulain. H, Gauthier. J, Hua-Van, A, Musset. K, Jakubowska. A, Aury. J.M, Volkoff. A.N, Huguet. E, Herrero. S, Drezen. J.M. Recurrent Domestication by Lepidoptera of Genes from Their Parasites Mediated by Bracoviruses. Plos genetics. (online). 2015. (citado 17 jun 2018). Disponible en: http://journals.plos.org/plosgenetics/article?id=10.1371/journal.pgen.1005470

2. Rev Chilena Infectol. NDV-3, una vacuna recombinante para Candidaspp. y Staphylococcus aureus. [internet] 2013 [citado 17 jun 2018] Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S0716-10182013000100021&script=sci_arttext

Microarray: Neumonia

En este estudio, se desarrolló y optimizó una nueva RPM (RPM-IVDC1) que consistía en mosaicos de detector de 224 pb correspondientes a 9 subtipos de influenza A, 11 rinovirus, 28 enterovirus y otros 38 virus respiratorios para proporcionar sensibilidades de detección individuales y simultáneas que van desde 15 a 750 copias genómicas para 16 patógenos respiratorios comunes. Un total de 110 pacientes consecutivos con neumonía adquirida en la comunidad (CAP) ingresados ​​en 5 hospitales generales de distrito en Beijing durante un período de 1 año.

Referencia bibliografica:

1.Hongwei Shen, Weixian Shi, Ji Wang. Desarrollo de un nuevo ensayo basado en microarray de resecuenciación de patógenos para la detección de virus del tracto respiratorio de amplio espectro en pacientes con neumonía adquirida en la comunidad. [internet] PLos One.com 2013 [citado 11 Jun 2018] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3785410/

PCR Multiplex: Neumonia

Tema: Un novedoso ensayo de PCR cuantitativa para la detección de Streptococcus pneumoniae utilizando el objetivo del gen regulador de competencia comX

Objetivo: Crear un nuevo método de detección de Streptococcus pneumoniae en hemocultivos para así desarrollar un tratamiento oportuno con antibióticos apropiados.

Muestra:  suero

Tipo de ácido nucleico a ser extraído: ADN bacterial

Extraccion de ADN: 

• Lisis: se procesó de acuerdo con las instrucciones del fabricante, se eluyó en 50 μl de agua sin ADNsa (Sigma) y se almacenó a -20 ° C hasta su uso posterior.
• Purificación: kit MagNA Pure 96 DNA y Viral NA Small Volume
• Separación: kit MagNA Pure 96 DNA y Viral NA Small Volume

Gen a amplificar: lytA y comX 

Número de pares de bases: 76 pb para lytA- CDC y 170 pb para comX

Tipo de PCR: PCR cuantitativa

La PCR se realizó en el 7500 PCR en tiempo real (Applied Biosystems) con los siguientes parámetros de ciclo: 10 min a 95 ° C
                                 50 ciclos de 95 ° C durante 15 s
                                 60 ° C durante 1 min.

La PCR se analizo utilizando 7500 Fast Systems Software (Applied Biosystems), con un umbral de 220 436 unidades de fluorescencia relativas (RFU) para comX y 86 559 RFU para lytA

Visualización: Amplicones en equipo de detección y fotografía.

Sensibilidad:  lytA -CDC fue del 103% y fue del 97% para comX
Especificidad: especificidad analítica del 100%.

Referencia bibliografica:

1. Marrit N. Habets, Amelieke JH Cremers, Martine P. Boss. Un novedoso ensayo de PCR cuantitativa para la detección de Streptococcus pneumoniae utilizando el objetivo del gen regulador de competencia comX [internet] Paises Bajos. 2016 [revisado 03 Jun 2018] Disponible en: http://www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/jmm/65/2/129_jmm000204.pdf?expires=1531112522&id=id&accname=guest&checksum=83E3B2F22934F3B215432991A32FAAE0